Μπορεί το BamHI να απενεργοποιηθεί με θερμότητα;
Μπορεί το BamHI να απενεργοποιηθεί με θερμότητα;
Anonim

Αν και ο NdeI μπορώ είναι θερμότητα απενεργοποιημένη , BamHI -Η HF δεν μπορεί.

Με αυτόν τον τρόπο, πώς απενεργοποιείτε το BamHI;

Θερμότητα αδρανοποίηση διεξήχθη ως εξής για να προσεγγίσει ένα τυπικό πείραμα. Ένα μείγμα αντίδρασης 50 μl που περιέχει το κατάλληλο NEBuffer, 0,5 μg DNA θύμου μόσχου και 5 ή 10 μl περιοριστικής ενδονουκλεάσης (σε συγκέντρωση πώλησης) επωάστηκε στους 37°C για 60 λεπτά και στη συνέχεια στους 65°C ή 80°C για 20 λεπτά.

Ομοίως, ποια είναι η τοποθεσία περιορισμού για το BamHI; BamHI . Περιορισμός ενδονουκλεάση BamH I δεσμευμένη σε ένα μη ειδικό DNA. Το BamH I (από το Bacillus amyloliquefaciens) είναι τύπου II περιορισμός ενδονουκλεάση, που έχει την ικανότητα να αναγνωρίζει σύντομες αλληλουχίες (6 b.p.) DNA και να τις διασπά συγκεκριμένα σε έναν στόχο ιστοσελίδα.

Από αυτή την άποψη, χρειάζεται να θερμάνω το ένζυμο αδρανοποίησης περιορισμού;

Απενεργοποίηση του περιορισμός ενδονουκλεάσες γενικά δεν είναι απαραίτητη , αλλά σε ορισμένες περιπτώσεις μπορεί να αυξήσει την απόδοση μετασχηματισμού.

Τι είναι η απενεργοποίηση θερμότητας;

Θερμότητα - αδρανοποίηση ( θέρμανση στους 56°C για 30 λεπτά) γίνεται για να αδρανοποιώ συμπλήρωμα, μια ομάδα πρωτεϊνών που υπάρχουν στους ορούς που αποτελούν μέρος της ανοσολογικής απόκρισης. Θερμότητα έχει επίσης χρησιμοποιηθεί για την καταστροφή του μυκοπλάσματος στον ορό.

Συνιστάται: