Γιατί χρησιμοποιείται η γλυκόζη στην απομόνωση πλασμιδικού DNA;
Γιατί χρησιμοποιείται η γλυκόζη στην απομόνωση πλασμιδικού DNA;

Βίντεο: Γιατί χρησιμοποιείται η γλυκόζη στην απομόνωση πλασμιδικού DNA;

Βίντεο: Γιατί χρησιμοποιείται η γλυκόζη στην απομόνωση πλασμιδικού DNA;
Βίντεο: Το χορευτικό που εξελίχθηκε σε πρόταση γάμου - Δημήτρης & Κατερίνα 2024, Νοέμβριος
Anonim

Σκοπός αυτού του βήματος είναι να αυξηθεί ο αρχικός όγκος των κυψελών έτσι ώστε περισσότερο πλασμιδικό DNA μπορεί να απομονωθεί ανά προετοιμασία. Γλυκόζη προστίθεται για να αυξήσει την οσμωτική πίεση έξω από τα κύτταρα. Το Tris είναι ένας ρυθμιστικός παράγοντας μεταχειρισμένος για διατήρηση σταθερού pH (= 8,0).

Ομοίως, ποιος είναι ο ρόλος της γλυκόζης στην εξαγωγή DNA;

50mM (χιλιοστογραμμομοριακό) ζάχαρη γλυκόζης προστίθεται στο ρυθμιστικό διάλυμα GTE για να διατηρηθεί η ωσμωτικότητα όπου η συγκέντρωση της διαλυμένης ουσίας έξω από τα κύτταρα είναι κοντά σε αυτήν εντός των κυττάρων. Αυτό αποτρέπει την πρόωρη λύση των κυττάρων, η οποία μπορεί να προκαλέσει χαμηλότερη DNA αποδίδει λόγω συσσωμάτωσης και υποβάθμισης.

Επιπλέον, γιατί χρησιμοποιείται το NaOH στην εξαγωγή DNA; Σε Απομόνωση DNA ή εξαγωγή , NaOH ( Υδροξείδιο του νατρίου ) είναι μεταχειρισμένος ως αλκαλικό ρυθμιστικό λύσης. Βασικά βοηθά στη διάλυση της κυτταρικής μεμβράνης έτσι ώστε τα εσωτερικά συστατικά του κυττάρου, συμπεριλαμβανομένων των DNA βγαίνω έξω.

Ως εκ τούτου, ποιος είναι ο σκοπός της απομόνωσης πλασμιδικού DNA;

Απομόνωση πλασμιδίου . ο απομόνωση του πλασμιδικό DNA από βακτήρια είναι μια κρίσιμη τεχνική στη μοριακή βιολογία και είναι ένα ουσιαστικό βήμα σε πολλές διαδικασίες όπως η κλωνοποίηση, DNA αλληλουχία, επιμόλυνση και γονιδιακή θεραπεία. Αυτοί οι χειρισμοί απαιτούν την απομόνωση υψηλής καθαρότητας πλασμιδικό DNA.

Πώς απομονώνετε το DNA του πλασμιδίου από το E coli;

ο απομόνωση του πλασμιδικό DNA από Ε . coli Η χρήση αλκαλικής λύσης είναι μια καλά καθιερωμένη μέθοδος. μι . coli με πλασμίδιο καλλιεργείται σε μέσα με αντιβιοτικά σε υψηλή κυτταρική πυκνότητα, συλλέγεται και στη συνέχεια λύεται με διάλυμα SDS/NaOH.

Συνιστάται: