Μπορείτε να ακολουθήσετε το προϊόν PCR;
Μπορείτε να ακολουθήσετε το προϊόν PCR;

Βίντεο: Μπορείτε να ακολουθήσετε το προϊόν PCR;

Βίντεο: Μπορείτε να ακολουθήσετε το προϊόν PCR;
Βίντεο: RT-PCR made EASY - Reverese Transcriptase PCR for detection and test of Viral DNA 2024, Νοέμβριος
Anonim

Απευθείας Αλληλουχία του Προϊόντα PCR . Είναι πολύ πιθανό να απευθείας αλληλουχία ένα Προϊόν PCR χωρίς πρώτα να κλωνοποιηθεί το θραύσμα. Απευθείας Αλληλουχία PCR είναι σπάνια επιτυχής εκτός και αν εσείς αφιερώστε λίγο χρόνο για να το εξασφαλίσετε εσείς δεν πέφτουν σε ένας από τις πολλές παγίδες.

Με αυτόν τον τρόπο, τι είναι η αλληλουχία PCR;

Απευθείας Αλληλουχία του PCR Προϊόντα. Πρέπει να αφαιρέσετε όλα PCR εκκινητές και μη ενσωματωμένα νουκλεοτίδια πριν το προϊόν είναι αλληλουχία . Αλληλουχία χρησιμοποιεί μόνο ένα αστάρι αντί για τα δύο που χρησιμοποιούνται PCR . Αν δεν αφαιρέσετε και τα δύο αστάρια, θα πάρετε δύο ακολουθίες επάλληλα μεταξύ τους που δεν είναι ευανάγνωστα.

Ομοίως, μπορώ να χρησιμοποιήσω εκκινητές PCR για τον προσδιορισμό της αλληλουχίας; PCR εκκινητές προορίζονται για PCR ενίσχυση για να αποκτήσετε ένα αμπλικόνιο. Εκκινητές προσδιορισμού αλληλουχίας είναι μεταχειρισμένος προς το αλληλουχία ένα θραύσμα DNA και αποκαλύπτουν το DNA του αλληλουχία αναγνωρίζω. 4. Δύο PCR εκκινητές χρειάζονται σε α PCR αντίδραση (συνήθως)? μόνο ένα εκκινητής αλληλουχίας προστίθεται στο α αλληλουχία αντίδραση.

Έχοντας αυτό υπόψη, πώς δοκιμάζετε τα προϊόντα PCR;

Ανίχνευση και ανάλυση των Προϊόντα PCR . ο προϊόν του α PCR θα πρέπει να είναι ένα θραύσμα ή θραύσματα DNA καθορισμένου μήκους. Πολλές τεχνικές μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ανίχνευση ενισχυμένων αλληλουχιών (βλ. Πίνακα). Η απλούστερη και ευρέως χρησιμοποιούμενη τεχνική είναι η ηλεκτροφόρηση του Προϊόν PCR σε πήκτωμα αγαρόζης με EtBr (βρωμιούχο αιθίδιο).

Γιατί είναι απαραίτητος ο καθαρισμός των προϊόντων PCR πριν από τον προσδιορισμό της αλληλουχίας;

Κάθαρση του DNA από α PCR αντίδραση είναι τυπικά απαραίτητο για κατάντη χρήση και διευκολύνει την απομάκρυνση ενζύμων, νουκλεοτιδίων, εκκινητών και ρυθμιστικών συστατικών.

Συνιστάται: