Γιατί δεν κόβεται ένα ένζυμο περιορισμού;

2024 Συγγραφέας: Stanley Ellington | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2023-12-16 00:15

Μπορεί να υπάρχουν πολλοί διαφορετικοί λόγοι για τους οποίους σας το ένζυμο περιορισμού δεν κόβει το DNA όπως εξετάζεται σε αυτό το βίντεο. Η παρασκευή του DNA προς διάσπαση πρέπει να είναι απαλλαγμένο από ρύπους όπως φαινόλη, χλωροφόρμιο, αλκοόλ, EDTA, απορρυπαντικά ή υπερβολικά άλατα, τα οποία μπορούν να επηρεάσουν περιοριστικό ένζυμο δραστηριότητα.

Από αυτή την άποψη, γιατί τα περιοριστικά ένζυμα δεν κόβουν το βακτηριακό DNA;

Βακτήρια έχω περιοριστικά ένζυμα , επίσης λέγεται περιοριστικές ενδονουκλεάσες , οι οποίες Τομή δίκλωνο DNA σε συγκεκριμένα σημεία σε θραύσματα. Με ενδιαφέρο, περιοριστικά ένζυμα μην κόβουν τα δικά τους DNA . Βακτήρια αποτρέψουν τη δική τους DNA από κομματάκι κάτω από περιοριστικό ένζυμο μέσω μεθυλίωσης του περιορισμός τοποθεσίες.

Μπορεί επίσης να ρωτήσει κανείς, πού κόβουν τα ένζυμα περιορισμού; Ένζυμο περιορισμού Τύποι Γενικά, Τύπος Ι ένζυμα κόβονται DNA σε θέσεις απομακρυσμένες από την αλληλουχία αναγνώρισης. Τύπος II Τομή DNA εντός ή κοντά στην αλληλουχία αναγνώρισης. Τύπος III Τομή DNA κοντά σε αλληλουχίες αναγνώρισης. και Τύπου IV διασπούν το μεθυλιωμένο DNA.

Ομοίως, ερωτάται, τι συμβαίνει εάν προσθέσετε πάρα πολύ ένζυμο περιορισμού;

Μπορεί να εμφανιστεί ατελής πέψη όταν πάρα πολύ ή πολύ λίγο ένζυμο χρησιμοποιείται. ο παρουσία μολυσματικών ουσιών σε ο Δείγμα DNA μπορώ αναστέλλω τα ένζυμα , με αποτέλεσμα επίσης ατελής πέψη. Μερικοί περιοριστικά ένζυμα απαιτούν συμπαράγοντες για πλήρη δραστηριότητα.

Γιατί δεν λειτουργεί το περιοριστικό μου σύστημα;

Ελλιπής ή όχι πέψη λόγω της ενζυμικής δραστηριότητας που εμποδίζεται από τη μεθυλίωση του DNA. Εάν το ένζυμο σας είναι ενεργό και χωνεύει το έλεγχος του DNA και ο Η αντίδραση ρυθμίζεται χρησιμοποιώντας τις βέλτιστες συνθήκες, αλλά εξακολουθείτε να βλέπετε θέματα με πέψη , μπορεί να είναι επειδή ο το ένζυμο αναστέλλεται από τη μεθυλίωση του ο πρότυπο DNA.